| Tez Türü | Yüksek Lisans |
| Ülke | Türkiye |
| Kurum/Üniversite | Kafkas Üniversitesi |
| Enstitü | Sağlık Bilimleri Enstitüsü |
| Anabilimdalı | Mikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı |
| Tez Onay Yılı | 2013 |
| Öğrenci Adı ve Soyadı | Harun ÖZTÜRK |
| Tez Danışmanı | YRD. DOÇ. DR. FATİH BÜYÜK |
| Türkçe Özet | Brusellozis, zoonotik karakterinin yanı sıra koyun, keçi ve sığır gibi çiftlikhayvanlarında abort, infertilite gibi dölverimi problemleri ile süt ve et üretim ve kalitekaybına yol açan infeksiyöz bakteriyel bir hastalıktır. Bu ekonomik kayıpların önlenmesindeuygulanacak kontrol ve koruma çalışmalarının planlanması için brusellozisin yayılımını veprevalansını bilmek oldukça önemlidir. Bu tür çalışmalarda hızlı ve güvenilir sonuç verentanısal bir laboratuar testinin olması büyük fayda sağlamaktadır.Çiftlik hayvanlarında brusellozisin teşhisinde serolojik tekniklerin kullanılabilirliği,karşılaştırmalı analizi ve duyarlılıklarının belirlenmesinin amaçlandığı bu çalışmada,geleneksel işletmeciliğin yapıldığı Kars yöresine ait atık hikayesi olan ve brusellozise karşıaşılanmamış 100 inek ve 100 koyun ile 100 adet at küme örnekleme yöntemi ile çalışmayadahil edildi. Brucella antikorlarının varlığı Rose Bengal Plate Test (RBPT), SerumAglütinasyon Test (SAT) ve NERIFA teknikleri ile araştırıldı. B. abortus S99 suşundanhazırlanan Rose Bengal boyası ile boyanmış ticari RBPT antijeni ile serum örneği temiz birlam üzerinde karıştırılarak 4-5 dk içinde oluşan aglütinasyon pozitif olarak kabul edildi. B.abortus S99 suşundan hazırlanan Brucella tüp aglütinasyon antijeni ilavesi ile 1/10 ile 1/320arası son konsantrasyonları hazırlanan serum örneklerinden 37 ⁰C'de bir gece inkübasyonunutakiben dantelâ tarzında çökelti verenler pozitif reaksiyon olarak kabul edildi. Tanısal titreolarak inek ve atlar için 1/40 ve üzeri, koyunlar için 1/20 ve üzeri dilüsyonlar dikkate alındı.Hızlı immün-filtrasyon tekniği ile anti-Brucella lipopolisakkarit (LPS) antikorlarını tespitetmek amacıyla kullanılan NERIFA testinde serum örnekleri üretici firmanın talimatlarıdoğrultusunda işlendi ve test penceresinin sağındaki test alanı ile solundaki internal kontrolünrenk yoğunlukları karşılaştırılarak sonuçlar kuvvetli pozitif, zayıf pozitif ve negatif olarakdeğerlendirildi.İncelenen 100 inek kan serum örneğinin RBPT ile 26 (%26)'sı, SAT ile 23 (%23)'üve NERIFA ile 25 (%25)'i, 100 koyun kan serum örneğinin RBPT ile 18 (%18)'i, SAT ile 14(14)'ü ve NERIFA ile 21 (%21)' i ve 100 at serum örneğinin RBPT ile 13 (%13)'ü, SAT ile14 (%14)'ü ve NERIFA ile 12 (%12)'si Brucella antikorları yönünden pozitif saptandı.NERIFA'nın sensitivite ve spesifitesi ineklerde sırasıyla %87 ve %93; koyunlarda %85 ve%89; atlarda %78 ve %98 olarak saptandı. NERIFA ile RBPT arasındaki uyuşma inek (kappa: 0,921) ve atlarda (kappa: 0,862) mükemmele yakın iken; koyunlarda (kappa: 0,713)önemli derecede uyuşma sağlandı.Çiftlik hayvanlarında Brucella infeksiyonlarının teşhisinde saha ve sınırlı laboratuarkoşullarında NERIFA'nın RBPT gibi hızlı tarama testi olarak kullanılabileceği ve sonuçlarındaha ileri tekniklerle (c-ELISA) doğrulanması gerektiği düşünülmektedir. |
| İlgilizce Özet | Brucellosis, possesses a zoonotic character, is a infectious bacterial disease thatcauses abortion and infertility problems, losses in milk and meat production and quality infarm animals such as sheep, goats and cattle. To know the prevalence and spread ofbrucellosis is very important for the planning of control and preventive measures applied inthe prevention of economic losses. Existence of a fast and reliable diagnostic laboratory testwould provide great benefits in these process.In this study, it was aimed to determine the availability, comparative analysis andsensitivity of serological techniques for the diagnosis of brucellosis in livestock. One hundredcattle and 100 sheep with a history of abortion and have not been vaccinated againstbrucellosis and 100 horse from the farms of traditional management in Kars region wereincluded in the study with a cluster sampling method. Brucella antibodies were tested throughRose Bengal Plate Test (RBPT), Serum Agglutination Test (SAT) and non-enzymatic rapidimmunofiltration assay (NERIFA). Commercially available RBPT antigen prepared from B.abortus S99 strain and stained with Rose Bengal stain was stirred on clean slide with serumsample and the agglutination occured within 4-5 minutes were considered positive. The serumsamples with the final concentrations between 1.10 and 1/320 through the addition of tubeagglutination antigen prepared from B. abortus S99 strains were considered positive with alace style precipitate after overnight incubation at 37 ⁰C. Of these 1/40 and above for thecattle and horse and 1/20 and above dilutions for sheep were considered as diagnostic titer. InNERIFA used for detection of anti-Brucella lipopolysaccharide (LPS) antibody with rapidimmuno-filtration technique, serum samples were tested in accordance to the manufacturer'sinstructions and the results were fixed on as strong positive, weak positive or negative bycomparing of the color density of the test area and internal control on the right and left side ofthe test window, respectively.Out of 100 cattle samples 26 (26%) were detected positive in RBPT, 23 (23%) inSAT and 25 (25%) in NERIFA in terms of Brucella antibodies. Out of sheep serum samples18 (%18) with RBPT, 14 (14) with SAT and 21 (%21 with NERIFA were found positive. Forhorse samples 13 (%13) with RBPT, 14 (%14) with SAT and 12 (%12) NERIFA werepositive for Brucella antibodies. The sensitivity and specifity of NERIFA was found as 87%and 93% in cattle, 85% and 89% in sheep and 78% and 98% in horse. The aggrement betweenNERIFA and RBPT was found as almost perfectly in cattle (kappa: 0,921) and horse (kappa:0,862), while substantially in sheep (kappa: 0,713).NERIFA can be used as a fast screening test such as the RBPT in the diagnosis ofBrucella infections in farm animals both in the field and in limited laboratory conditions andthe results are needed to be verified with more advanced techniques like c-ELISA. |
