| Yazarlar |
Prof. Dr. Öztürk ÖZDEMİR
Kafkas Üniversitesi, Türkiye |
| Özet |
| Ekspresyon vektörleri normal yada rekombine bir genin istenilen hücreye aktarılması, ekspresyonu ve proteinin saflastırılmasına olanak saglayacak sekilde olusturulurlar. Günümüzde mem hücrelerin transient yada stabil gen transferi için kullanılan ve yapılarında tasıdıkları antibiyotik dirençlilik geni ile hücre seçilimleri kolaylıkla yapılabilen birden fazla vektör bulunmaktadır. Bunlardan pCDM8 ve türevleri, pcDNAI/Ampisilin ökaryotik hücrelerde, pRC/CMV, pcDNA3 ve pRC/RSV vektörleri ise memeli hücre transfeksyonunda en yaygın kullanılan vektörlerdir. Bu arastırmada, memeli hücreleri yapısında bakteri (Moroxella spp.) monospesifik sitozin-5 DNA metiltransferaz (MTaz) M.Msp1 geni tasıyan, yeni olusturulmus memeli gen transfer vektörü ile transfekte edildi ve gen ekspresyonları yapıldı. Bunun için, COS hücreleri ekspresyonunda kullanılan vektöre analog, stabil ve trasient gen transferinde kullanılabilir bir vektör olusturuldu. PCR ile birlikte amplifiye edilen bakteriyel sitozin-5 MTaz, omurgalı nükleer transport sinyali (NLS) SV40 VP1 ve markır enzim glutatyon-S-transferaz (GST) genleri ökaryotik hücre transfeksiyonu için uygun bir vektör olan pcDNA3’e aktarıldı. Memeli hücrelerinde otonom replikasyon için yapısında SV40 replikasyon orijini ve güçlü sitomegalovirus ve T7 promotorları bulunan ve yeni olusturulan plasmid pOZT4 olarak adlandırıldı. Insan böbrek epitel 293 ve CHO hücreleri pOZT4 ile basarı ile transfekte deldi, enzimin hücre DNA’larını CCGG dizilerinden metilledigi saptandı. |
| Anahtar Kelimeler |
| plazmitler,memeliler,DNA metiltransferaz,genetik vektör,transfeksiyon,gen ifadesi,DNA metilasyonu |
| Makale Türü | Özgün Makale |
| Makale Alt Türü | SSCI, AHCI, SCI, SCI-Exp dergilerinde yayımlanan tam makale |
| Dergi Adı | Turkish Journal of Biology |
| Dergi Tarandığı Indeksler | SSCI |
| Makale Dili | İngilizce |
| Basım Tarihi | 03-2009 |
| Cilt No | 22 |
| Sayı | 2 |
| Sayfalar | 161 / 170 |
